基因敲除

根据客户需求，结合靶基因的情况采取最佳的敲除策略。包括：

(1)小片段敲除方案：gRNA设在外显子2两端的内含子中，敲除外显子编码碱基数为非3倍数，敲除后可造成移码；

(2)移码敲除方案：gRNA设在外显子上，缺失的碱基数为非3倍数，敲除后可发生移码突变；

(3)大片段敲除方案：将整个基因的编码序列敲除，达到大片段敲除的效果。

基因定点突变敲除

通过核转染法将gRNA载体（含Cas9）和Donor共转入细胞中，gRNA和Cas9复合物造成靶位点DNA双链断裂后，细胞以外源携带目标点突变的Donor作为模板进行同源重组修复（HDR），将目标点突变重组到基因组靶位点。

基因片段敲入

基因片段的敲入包括：
(1)特定位点敲入融合蛋白片段，如EGFP标签等；
(2)敲除特定基因同时敲入外来基因片段。

特定位点融合蛋白

敲除特定基因同时敲入外来基因片段

基因过表达

通过慢病毒感染或核转染法，将过表达载体转入细胞中，并通过药物筛选获得基因稳定表达的细胞株。

基因表达干扰

通过慢病毒将干扰载体转入细胞中，并通过药物筛选获得基因稳定表达的细胞株。

技术流程

项目交付内容

• 细胞检测报告
• 阳性克隆鉴定报告
• 细胞株冻存管

目前已成功进行基因编辑的细胞种类